一、為什么選擇點(diǎn)突變小鼠模型？
點(diǎn)突變是人類疾病和生物功能研究中最常見、最根本的遺傳變異形式。與傳統(tǒng)的基因敲除相比，點(diǎn)突變模型能更真實(shí)地模擬：
· 人類遺傳疾?。壕珳?zhǔn)再現(xiàn)患者身上發(fā)現(xiàn)的特定致病性單核苷酸變異。
· 功能獲得/失活研究：通過引入特定氨基酸替換，研究蛋白質(zhì)功能域的細(xì)微變化。
· 藥物靶點(diǎn)驗(yàn)證：在體內(nèi)評(píng)估針對(duì)特定突變位點(diǎn)（如激酶域突變）的靶向藥物療效。
· 單核苷酸多態(tài)性研究：探索非編碼區(qū)SNP對(duì)基因表達(dá)調(diào)控的影響。
二、點(diǎn)突變小鼠模型構(gòu)建策略
構(gòu)建策略1：利用CRISPR/Cas9技術(shù)將突變點(diǎn)（人類致病候選點(diǎn)突變）引入到大鼠/小鼠同源基因?qū)?yīng)位置。
構(gòu)建策略2：利用ABE堿基編輯系統(tǒng)將目的基因組特定位點(diǎn)A/T突變?yōu)镚/C。
構(gòu)建策略3：利用BE3堿基編輯系統(tǒng)(Optimized)將目的基因組特定位點(diǎn)G/C突變?yōu)锳/T。
三、技術(shù)與服務(wù)優(yōu)勢(shì)
1. 精準(zhǔn)高效的技術(shù)平臺(tái)
我們主要采用CRISPR/Cas9系統(tǒng)，結(jié)合同源定向修復(fù)技術(shù)，實(shí)現(xiàn)高效率、低脫靶的精準(zhǔn)基因編輯。我們經(jīng)驗(yàn)豐富的團(tuán)隊(duì)能應(yīng)對(duì)各種復(fù)雜的設(shè)計(jì)挑戰(zhàn)。
2. 全方位的模型構(gòu)建服務(wù)
· 策略設(shè)計(jì)與優(yōu)化：根據(jù)您的目標(biāo)位點(diǎn)，為您設(shè)計(jì)最佳的gRNA、Donor DNA及實(shí)驗(yàn)方案。
· 胚胎顯微注射：由資深技術(shù)人員操作，確保高成功率。
· 基因型鑒定與篩選：我們不僅進(jìn)行常規(guī)PCR鑒定，更提供測(cè)序驗(yàn)證，確保突變準(zhǔn)確無誤，排除隨機(jī)整合。
· 模型擴(kuò)繁與保種：為您快速建立穩(wěn)定的雜合子/純合子種群，并提供胚胎或精子冷凍服務(wù)，安全保種您珍貴的模型。
3. 品質(zhì)保證
· 精準(zhǔn)驗(yàn)證：每個(gè)模型都經(jīng)過雙向測(cè)序確認(rèn)，并提供詳細(xì)的基因型鑒定報(bào)告。
· 純凈背景：可根據(jù)您的研究需求，在不同遺傳背景下構(gòu)建模型。
· 可遺傳性：我們確保構(gòu)建的突變能夠穩(wěn)定地遺傳給后代。
四、常見問題解答
· Q: 構(gòu)建一個(gè)點(diǎn)突變模型需要多長(zhǎng)時(shí)間？
· A: 從啟動(dòng)注射到獲得經(jīng)鑒定的Founder小鼠，通常需要3-4個(gè)月。具體時(shí)間因項(xiàng)目難度而異。
· Q: 如何保證點(diǎn)突變是精準(zhǔn)引入，而沒有隨機(jī)插入？
· A: 我們通過精心的gRNA設(shè)計(jì)和嚴(yán)格的基因型鑒定流程來確保。最終的測(cè)序驗(yàn)證是鑒別精準(zhǔn)編輯與隨機(jī)整合的金標(biāo)準(zhǔn)。
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